【求助】为什么养的上皮细胞总是不能贴壁?
手术取正常粘膜组织。
消化酶是Dispase和Collagenase,
培养皿用L-Polylysine处理过。
培养液为DMEM含有Hepes(20mM)、胰岛素200U/L、肝素钠100mg/L、表皮生长因子0.01mg/L、进口胎牛血清(5%)。
已经培养过将近十次,一直没有贴壁,真不知如何换液好。有时候接种第三天后一摇培养皿,相差显微镜下见细胞飘来飘去的。不知道是什么原因?其中有两次是污染。有没有什么好方法促进使细胞贴壁呢?听说上皮细胞是比较容易贴壁的,但一直没发现过贴壁。
请各位大虾们多多指导!!不胜感激。