【求助】包涵体表达后的电泳检测
发布于 2007-01-30 · 浏览 3297 · IP 爱尔兰爱尔兰
这个帖子发布于 18 年零 101 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近在做包涵体的纯化，请教战友们一个问题：
对于可溶性蛋白，如果想知道诱导是否成功，我们一般取1ml菌离心后，用loading buffer煮样5分钟，然后离心，取上清电泳。
包涵体的操作protocol是不是一样？我简单的写一下，请战友们指正：
1 取1 ml菌液，离心，弃上清。
2 加入10 ul 5×SDS loading buffer，煮样5分钟。
3 加入40 ul 无菌水，混匀。不离心。
4 取30 ul上样，电泳。
我搜索过本版的帖子，都是关于纯化的，所以不确定包涵体能否溶解在SDS溶液里，所以在这里请教各位。（其实可以取上清和沉淀分别电泳吧，不过现在实验室只有pre-cast的胶，用来摸条件的话比较亏）
先谢谢了！
对于可溶性蛋白，如果想知道诱导是否成功，我们一般取1ml菌离心后，用loading buffer煮样5分钟，然后离心，取上清电泳。
包涵体的操作protocol是不是一样？我简单的写一下，请战友们指正：
1 取1 ml菌液，离心，弃上清。
2 加入10 ul 5×SDS loading buffer，煮样5分钟。
3 加入40 ul 无菌水，混匀。不离心。
4 取30 ul上样，电泳。
我搜索过本版的帖子，都是关于纯化的，所以不确定包涵体能否溶解在SDS溶液里，所以在这里请教各位。（其实可以取上清和沉淀分别电泳吧，不过现在实验室只有pre-cast的胶，用来摸条件的话比较亏）
先谢谢了！
最后编辑于 2007-01-30 · 浏览 3297
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