【求助】关于膜片钳急性分离豚鼠心肌细胞

急求助各位大侠，我的豚鼠心肌细胞这一两个月总是分离不好，前天刚做了一次，实验室温度17度，各灌流液提前一个晚上调的PH，无钙台氏液PH7.43，调的时候液体温度是16度，KB液7.39,温度也是16度。不知道在灌流的时候当出口温度为37度时，灌流液的PH是不是降低了？如果是，一般降到多少？我觉得我的细胞不好，首先还是考虑液体的PH值不理想，怎样保证灌流时的台氏液和温浴下的KB液PH在一个合适的数值，这个数值不知各位的是多少？现在由于环境温度不比前几个月，所以我现在消化的时间都延长了些，一般都在14分钟以上。这次是消化了16分钟，消化完了使用KB液冲灌了2分钟，剪下心室在温浴的KB液（温浴是在超级恒温水浴的水槽内，但是我发现当我的灌流出口温度为37度时，水槽内的温度总是要高于37度，一般接近40度，真是矛盾，为了保证灌流管出口温度，一直都是这样）中吹打。然后吸取细胞悬液滴到小培养皿镜下观察，细胞数量和状态还可以，实验室温度下静置2小时后使用电极外液冲洗复钙（钙浓度1.8mM),本次细胞比较耐钙，细胞边缘光滑发亮的细胞数目还可以，但总是电极封接的电阻不上升，总是在300M左右，要么就是一封接就收缩死亡。没有细胞能够封接成功。
请教，大家都是怎么做的？遇到过这种情况吗？怎样解决这些问题？（我做的是钾通道。）不胜感激！！