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硫铵沉淀后能直接用镍柱作纯化吗?

发布于 2003-12-28 · 浏览 4815 · IP 北京北京
这个帖子发布于 21 年零 134 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我最近也在做镍柱纯化,效果一直不是很理想。因为我的蛋白容易降解,所以我做了硫铵沉淀,目的蛋白都在沉淀中,我想加入lysis buffer 后不透析直接上柱子进行纯化,不知可不可以,沉淀中残留的硫铵对柱子有影响吗?

我没用硫铵沉淀前用上清作过几次纯化(我做的是可溶表达),用的是amasherm的Hitrap-chelating column,洗脱后的目的蛋白带,比原液中细了好多,量很少,穿透中只有很少量,这是怎么回事?

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4815

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