有奖直播：顶刊中的多色流式配色技巧与注意事项
在连续多年的国自然基金项目结果中，免疫学以压倒性优势蝉联热门研究领域，25 年中标项目数量更是突破千项大关！其中，流式细胞术是免疫学研究最经典且最常用的实验技术。仅过去 3 个月，超 30 篇以流式细胞术为基础的免疫学研究登上 Nature、Cell 等顶刊，其多参数、高通量的技术优势，成为解码 T 细胞、巨噬细胞等免疫机制研究工具。但流式实验却是让人又爱又恨！从样本制备、荧光配色到数据展示，每一步都是「细节控」的考验：细胞活性要求高，抗体搭配易串色，非特异染色假阳性、数据解读无策略等。（点此报名直播即可免费领有流式实验资料手册、天猫精灵、蓝牙耳机及外交官双肩包等惊喜好礼）
在流式细胞术中，同学们经常会问：
●如何轻松获得高质量、发表级流式实验数据？尤其面对稀有样本~
●除了表面和胞内蛋白染色，如何通过流式一次搞定 RNA 和蛋白共检？
●流式实验都有哪些容易掉进的坑？又如何避开呢？
●哪里可以找到全面且经过验证的样本处理和详细实验步骤？
为了让大家轻松上手流式细胞术，赛默飞世尔科学技术专家联合丁香园，于 5 月 15 日 14:00 给大家带来《流式检测「升维」前沿应用与高维流式避坑指南》在线直播，从配色、补偿到数据分析，全方位总结流式避坑技巧，细致讲解多色流式技术。还有 PrimeFlow RNA 技术详解及高分文献分享，帮助大家顺利实现多色共染和 RNA 共标。
现成功报名直播的前 400 名幸运者免费获得赛默飞上百页纸质版《流式细胞分析实验方案》，包含流式样本制备、细胞刺激、补偿调节及表型分析等 Protocol，干货满满，赶快来领取！在直播当日，更有机会获得天猫精灵、蓝牙耳机、京东卡及外交官双肩包等惊喜好礼～点击下方图片或点此直达
流式手册干货抢先看
从样本制备到流式上机检测，我们还会遇到很多的实验细节和特殊样本处理问题。结合多年实验经验，精心总结《流式细胞分析实验方案》，你想知道的实验细节在这里都能找到答案。比如大家经常遇到的胞内抗原染色方案：
1. 细胞内（胞质）蛋白染色：适用于检测在体外或体内活化后的细胞，胞浆内蛋白、细胞因子或其他分泌蛋白。
1）细胞刺激：利用细胞刺激混合物（加蛋白质转运抑制剂）刺激细胞 4 h，促进效应因子的产生。
2）收集细胞并制备成单细胞悬液；利用可固定细胞活性染料进行死活染色（可选）。
3）细胞表面抗原染色，4 ℃，避光 15～30 分钟。
4）最后一次洗涤后，弃掉上清液，充分涡旋混匀样本，通常保留 100 μL 左右体积。
5）加入100 μL流式胞内固定液以固定细胞，涡旋混匀，室温，避光孵育 20～60 分钟。
6）加入 2 mL 1X 流式破膜缓冲液， 室温 400～600 xg 离心 5 分钟，弃掉上清液。
7）加 100μL 1X 流式破膜液重悬细胞，并加入流式胞内抗体，室温，避光孵育 20～60 分钟。
8）加入 2 mL 1X 破膜液，离心后弃掉上清液，以适当体积的流式细胞染色缓冲液重悬细胞。
2. 细胞内（核内）蛋白染色：适用于在单细胞水平上同时检测细胞核内抗原、细胞胞浆抗原以及细胞表面抗原。
1）收集细胞并制备成单细胞悬液；利用可固定细胞活性染料进行死活染色（可选）。
2）细胞表面抗原染色，4 ℃，避光 15～30 分钟。
3）最后一次洗涤后，弃掉上清液，充分涡旋混匀样本，通常保留 100 μL 左右体积。
4）加入 1 mL Foxp3 固定/破膜工作液，涡旋混匀，在 2～8 °C 或室温，避光孵育 30-60 分钟。
5）加入2 mL 1X破膜缓冲液，室温 400～600 xg 离心 5 分钟，弃掉上清液 。
6）用 1X 破膜缓冲液重悬细胞 ，终体积调至约 100 μL，加入流式胞内抗体，室温，避光孵育 30 分钟以上。
7）加入 2 mL 1X 破膜缓冲液，离心后弃掉上清液，以适当体积的流式细胞染色缓冲液重悬细胞。
更多流式细胞实验方案及技巧均会展示在手册中，快来点击此处报名前 400 名即可获得上百页流式实验纸质版手册～
心动福利双响炮
报名礼：400 份流式实验步骤干货资料
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直播当日奖品：5 月 15 日当天直播 99 份惊喜好礼
直播当天抽奖环节，99 位流式幸运官将有机会获得天猫精灵蓝牙音箱、蓝牙耳机、超值京东卡、外交官双肩包、笔记本电脑支架及赛默飞抗体系列冰盒等丰厚精美礼品。
注：以上所有奖品预计将于 5 月下旬陆续发出。
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