谷氨酸棒杆菌pec-xk99e质粒表达不了

小弟在做谷氨酸棒杆菌的质粒表达，用pec-xk99e质粒，构建的质粒参考了许多文献，模仿了一样的启动子以及RBS区域。质粒已经能在dh5α中表达了，但在谷氨酸棒杆菌就是表达不了，换了很多蛋白都表达不了。

请问各位能从什么方面找到问题。

表达的是红色荧光蛋白，在dh5α中很明显。SD序列参考文献中的有谷棒通用的AAAGGA。质粒构建用的酶切加一步克隆。