【求助】肠道淋巴细胞提取
我最近在分离肠道细胞,结合了几篇文献分离两次了都不成功,遇到了以下问题:
1.分离得到细胞量很少,percoll梯度中间白膜层很少或者没有,1ml重悬细胞计数数量非常少。
2.每次都有很多絮状物。
请问细胞少是因为都死了还是消化不充分呢,絮状物是肠系膜吗,已经很仔细清理脂肪了,每一步振荡清洗。
使用的是胶原酶IV,为了得到更多细胞消化完之后采取师兄建议把剪碎的组织外面包滤网挤压了一遍,这一步出现了较多絮状物,是不是应该取消这步呢?
请各位大佬交流一下经验,非常感谢!
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1.分离得到细胞量很少,percoll梯度中间白膜层很少或者没有,1ml重悬细胞计数数量非常少。
2.每次都有很多絮状物。
请问细胞少是因为都死了还是消化不充分呢,絮状物是肠系膜吗,已经很仔细清理脂肪了,每一步振荡清洗。
使用的是胶原酶IV,为了得到更多细胞消化完之后采取师兄建议把剪碎的组织外面包滤网挤压了一遍,这一步出现了较多絮状物,是不是应该取消这步呢?
请各位大佬交流一下经验,非常感谢!