[求助]提取小鼠腹腔巨噬细胞不贴壁,怎么办?
我提取的步骤是:
(1)摘眼球放血处死小鼠(减少提取细胞中的红细胞)
(2)放于75%酒精中浸泡3min,
(3)于超净台中剪开皮肤,注入腹腔5ml无血清(有血清的也作过)1640培养基,揉搓腹部
(4)抽出腹水,离心,800rpm,5min,
(5)用含10%血清的1640重悬至1×10(6),铺于6孔板(2ml/孔)或96孔板(0.2ml/孔)。
(6)置于培养箱中培养,有时候发现2h就贴别很好,有时候4h贴壁也非常少呢?
不知道什么原因,请知道的朋友指教,非常感谢。