膜蛋白提取及co-IP
过表达膜蛋白,并用耦连beads的flag抗体去拽膜蛋白,银染后有很多非特异性条带。这是为什么呢?
裂解液是:
1 M Tris-HCl(pH 7.5):250 ul;
2.5M NaCl: 300 ul;
20% Triton X-100:250 ul
加去离子水(4100 ul)定容至5 ml;
然后加100mM PMSF: 50 ul;
加Proteinase inhibitor(100X):50 ul

过表达膜蛋白,并用耦连beads的flag抗体去拽膜蛋白,银染后有很多非特异性条带。这是为什么呢?
裂解液是:
1 M Tris-HCl(pH 7.5):250 ul;
2.5M NaCl: 300 ul;
20% Triton X-100:250 ul
加去离子水(4100 ul)定容至5 ml;
然后加100mM PMSF: 50 ul;
加Proteinase inhibitor(100X):50 ul