pET32a（+）质粒his tag

我的目的蛋白大概21.6kDa左右，跟pET32a(+)质粒连接，pET32a(+)质粒有两个his tag，我要是用N端的his tag，就会跟前面的蛋白形成融合蛋白，大概率会以包涵体的形式出现，就很难做，要是用C端的his tag，目的蛋白大小也差不多，但是前面就会还出现一个有着his tag的蛋白，我在纯化的时候，这俩个蛋白该怎么分离，因为大小也相差不大，一个17.3，一个23，等电点也相差不大，，求助求助