WB目标蛋白跑成一条直线

跑的小份子量蛋白，内参和其他的目标蛋白都很正常，就是这个目标蛋白总是跑成一条直线或是中间缝隙都是黑点，已经降低上样量，每孔3ul，浓度是5，上胶和分离胶都凝了半个小时，请问这样的条带是什么原因，求求各位大佬解答。