求助，WB磷酸化抗体洗不掉

我做的是P-mtor的WB，正常孵育完一抗二抗曝光后，用洗液洗掉，然后孵育总抗。之前都是这么做的没有问题，这次不知道为什么孵育完总抗之后，曝光出来还是磷酸化的样子。然后我又试了一次，换了其他牌子洗液，也换了个其他公司mtor的总抗，孵育完也还是不行，曝光的也还是磷酸化的条带。不知道为什么，是磷酸化的一抗结合力太强了吗？？