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长片段PCR扩增

精神病学医学生 · 最后编辑于 2024-09-06 · 来自 Android · IP 辽宁辽宁
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大家好,想请问一下大佬们

我有几个基因片段需要扩增,长度为:1500+bp、3000+bp、6000+bp不等

但是已经扩增好几次了跑胶均没有条带。

模板是细胞cDNA和血cDNA。基因在细胞中表达程度也还行。

目前用过AG、诺唯赞、巨匠生物的高保真酶。预变性时间为3min,延伸时间为30/S。

有什么方法可以改进一下 将片段扩增出来呢?

如果我怀疑引物有问题的话?能否跑qpcr验证引物特异性?

万分感谢🙏图片是我用AG酶、和巨匠生物分别扩展不同条带的跑胶结果🙏

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