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原核表达总是得不到可溶蛋白,全都是包涵体

发布于 2024-08-06 · 浏览 498 · IP 河北河北

做大肠杆菌BL21(DE3)表达植物中的糖基转移酶与蔗糖合酶的实验,用的载体为pRSFDuet1、pET28a这些T7表达系统的。准备做一篇文献的复现,用的载体与序列都是人家给出的NCBI上的原始序列,别人的宿主是PLysS。我就是重复不出来可溶表达。文献的诱导条件:16°C、IPTG 0.4mM(我0.05, 0.1, 0.2, 0.3都试过了),诱导24h,在OD600 0.4-0.5加的诱导剂。有没有大神指导为什么温度与IPTG都这么低了,可溶部分一点没有?

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最后编辑于 2024-08-06 · 浏览 498

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