求助|SD大鼠坐骨神经冰冻切片
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请教各位老师两个问题：
1、大鼠坐骨神经冰冻切片需要沉糖，我取材以后在4% PFA中浸泡过夜，然后转移至15%的蔗糖PBS溶液脱水，经历了30小时左右才沉糖，至20%的蔗糖已经第三天了，还没沉下去，请问这是为啥呢？该怎么办让它沉糖？
2、将之前沉糖成功的样品用oct包裹后放入液氮表面速冻，切片好像很难出片，脆性太大，连固态oct都切不完整（切片厚度8μm，箱体温度-20℃，刀头温度-20℃）；而用冰切机冷冻台缓慢冷冻的样品，虽然冰晶形成较多，但切片出片成功率高，厚薄均匀，oct包埋块能完整切出。这又是为啥呢？#四月难题#
最后编辑于 2024-04-18 · 浏览 474
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