蛋白诱导表达不出来

我用的质粒是pBAD-HisA，菌株是大肠杆菌Nissle 1917，蛋白大小约61kda。30℃，终浓度为0.1%的阿拉伯糖诱导表达6h,8h,10,12h后均未见目的条带，并且空载体在目的条带附近也有条带，我不知道是哪里出了问题，请各位大神指点

1-3为空载体诱导6h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀，4-6为工程菌诱导6h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀，7-9为空载体诱导8h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀，10-12为工程菌诱导8h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀。

1-3为空载体诱导10h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀，4-6为工程菌诱导10h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀，7-9为空载体诱导12h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀，10-12为工程菌诱导12h后的培养基上清，裂解液上清以及沉淀。