急求助：关于未预染Marker的使用问题

不好意思，向大家求教一个比较低级的问题，我买的Marker是没有预染的，电泳时只能看到溴酚蓝跑的一条直线.我要做WB:

1.能否在转膜以前把胶用考马斯亮蓝染色,再根据条带位置转膜,以节约膜?
会不会影响后面的免疫检测?

2.我第一次染凝胶后转膜,用的是45伏特,湿式转移,6个小时,结果膜上什么都没有,而胶上的条带还很清楚;

3.第二次电泳时没有染胶,直接电泳的,也是45伏特,7个小时,转膜后用丽春红染膜,考马斯亮蓝染胶,结果竟然胶和膜上都没有条带,我确定转膜时没有转反,是按照负极-胶-膜-正极的顺序放置的,而且跑胶时溴酚蓝在一条直线上,还没有跑到胶的底部,究竟什么原因,实在百思不得其解,急盼各位老师指点,谢谢!!!