原代提取人胃癌成纤维细胞的问题，求各位园子里的大神和战友解答，谢谢！

本人现在开始做成纤维细胞相关的课题，需要自己提取原代成纤维细胞，但是在过程中碰到了许多问题，由于实验室以前对于成纤维细胞甚至原代细胞的提取都是没有先例的，因此没有可以请教的师兄师姐，只能来园里求助。

我总共尝试过4次。前2次都是将提取下来的组织（胃癌组织和胃正常组织）放入PBS中冰上转运，然后在超净台使用碘伏双氧水浸泡消毒后，剪成1平方毫米的小块后，没有用胶原酶消化，直接将小块使用镊子枪头接种到培养皿上，放入37度培养箱倒置3-4h后，加入培养基（10% FBS的DMEM）。后2次是将提取下来的组织放入5X双抗的PBS中转运，浸泡时间大概10-20分钟，后转移至超净台，用5X双抗PBS冲洗3次，再剪成小块后转移至培养皿，倒置后加入培养基。

然后结果要么是培养皿过了1-2天后就会浑浊，镜下看就是污染，或者很多莫名其妙的碎片贴着壁，一副惨不忍睹的样子（图1，图2），要么就是过了很久都没有细胞爬出（超过1周，图3）.

求助各位大神。消毒方法是否有误？培养基是否需要加入生长因子？提高血清浓度？（胶原酶IV已到货，准备下次在上述基础上添加胶原酶消化试试）