【求助】关于胶质细胞免疫组化的问题

师兄于大约一年前将造模的脑组织的冰冻切片放置在多聚甲醛的小瓶子里保存着，我现在将其裱片后做星形胶质细胞GFAP的免疫组化，用了不同的一抗浓度，但都没有出现阳性结果，细胞都不明显，显色都较淡，请问这种情况与哪些因素有关？是不是冰冻切片泡得太久需要抗原修复呢？还是有可能我的ABC试剂盒过期了？请教各位有经验的高手！