WB配胶小知识点分享

WB实验最常用到的电泳胶形式是SDS-聚丙烯酰胺凝胶，也就是十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶，分离蛋白质的能力是通过凝胶形成的孔径大小决定的，而凝胶的孔径又决定于凝胶的不同浓度，我们在实验室中常用到的WB凝胶是由2种不同浓度的凝胶组合而成的，即上层的浓缩胶和下层的分离胶。

浓缩胶浓度为5%，主要是将样本上样时的高度差缩小，使所有泳道的蛋白都能够保持一致的电泳水平，让最终的条带整齐美观~

分离胶浓度一般为10%，可以比较好的区分分子量在15~100kDa范围的蛋白质，在分离胶中，不同分子量的蛋白质通过聚丙烯酰胺形成的立体孔道分子筛达到分离区分。下图显示了不同目标分子量的蛋白适合的分离胶浓度，可以参考：

配制一块合格的凝胶是做出优秀WB结果的先决条件，制胶有很多细节需要留心，有经验心得的站友可以分享一下自己成功的要素，遇到困难的研友们也可以把问题发出来，大家群策群力，让实验变得顺利起来~