原核表达蛋白表达不出来，求助！
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最近在做一个蛋白原核表达，已有文献报道不同物种的这种蛋白有在上清也有在沉淀。我是用的pet32a和Bl21感受态，蛋白本身48kd左右 加了一个his标签，试了37和16度 还有iptg浓度和不同表达时间，发现62kd左右均没有明显蛋白表达的痕迹，应该是没有表达出来，反而HIS15kd那里条带很粗。换了一个感受态rosetta，目的条带也没有明显表达 只不过his那的条带没有了，想知道这是什么原因呢？现在想换一个载体试试，不知道pet28a和它相比哪个更合适？或者想请教一下前辈们有什么改善意见
下图是37度1mM IPTG诱导后的结果图
最后编辑于 2024-01-07 · 浏览 850
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