更特定的 DNA 整合工具

2023年11月17日《Science》发表一篇观点： CRISPR 相关转座酶（CASTs）通过结合 DNA绑定的 Cas 效应蛋白和称为转座酶的 DNA 插入酶，实现了可编程 DNA 整合。CASTs 可在细菌和人类细胞中引入大 DNA货载进行基因组工程。V-K 型 CAST 由 Cas 效应器 Cas12k、转座酶 TnsB、腺苷三磷酸酶（ATP 酶）TnsC 和适配蛋白 TniQ 组成。这些 CAST 因其最小的尺寸和亚基数量以及单向整合货载 DNA 的能力而成为特别有吸引力的基因组工程工具。然而，V-K 型 CAST 的局限性在于它们极易发生全基因组范围的脱靶整合。本期第 784 页上，George 等人报告说，V-K 型 CASTs 的脱靶整合发生与 Cas12k 无关，揭示了一种非靶向转座机制。这种非靶向转座依赖于 TnsC 的浓度，这使得作者能够设计出特异性大大提高的 CAST 系统。