讨论|到底能不能在一个PCR管同时识别多重PCR反应？

随着多重PCR技术的兴起，超多重检测已经花样百出，但真的实现了“单管”超多重检测吗？是在一个PCR管同时识别多重靶标吗？

常见的超多重检测是基于多重荧光PCR技术与多联管拼接的方法实现的。

多重PCR（Multiplex Polymerase Chain Reactionm，PCR）是在一个PCR反应体系加入两对及以上的引物，各对引物分别结合在模板相对应部位，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应。

搭配实时荧光PCR技术，针对不同的靶标检测，设计不同的探针，选用不同光谱范围的荧光基团，一个PCR反应体系便可识别多个靶标。

但由于在荧光临近的波段内，相似的荧光基团会重叠，即荧光基团的发射光谱之间会相互干扰，这限制了多重PCR的发展。目前普遍水平支持4~6重（色）荧光通道，再继续增加荧光信号干扰会增大。

在这种情况下，其实一个PCR反应管中最多检测4~6种靶标。所以为实现超多重检测的，使用了四联管、六联管等拼接的形式，提高检测靶标的通量。

多重PCR技术在超多重检测应用上，因荧信号间的干扰受限。多联管拼接的方式，通过分管绕过了荧光信号增多，干扰增大的问题，实现了超多重检测。

这种曲线救国的方法，能用，相较传统检测还节约了一定的时间，但实际操作过程中，仍涉及多次加样、反复操作、样本通量不够···问题，总体时效终归还是差点意思。

反观一管多重，真正将操作流程精简至致，没有一步重复，每一分钟都花在刀刃上。

那到底能不能在一个PCR管同时识别多重PCR反应？实现一管超多重检测？