求助：截短蛋白质粒构建
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花匠是自己 推荐求各位杰青老师指导orz
一个150kD左右的蛋白，cDNA序列2760，我想按照结构域截短成20多kD和120多kD的截短体，用的pcDNA3.1+载体，c端加了3*flag，质粒构建测序没问题，起始密码子和终止密码子的位置也对，转染到293t细胞表达48h收样，wb检测用flag抗体完全测不到
这个会是载体表达效率的问题吗？我在全长序列后面加了3*flag可以检测到，但是和用vr1012载体构建的表达质粒（其他的基因）比，flag条带弱了很多，目前在考虑换载体
请问还有哪些原因会造成截短蛋白不表达
求大佬指教orzorzorz
最后编辑于 2023-11-14 · 浏览 1905
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