关于elisa封闭液和假阳性的问题
在做抗体检测,现在想摸索下封闭液的种类,就选择了很多种封闭液,用的5% 脱脂奶粉、2%BSA、3%鱼明胶,可是结果出来后,阳性和阴性血清OD值之间基本没有差别,数值差不多,都在1.4-1.6之间,空白孔的数值也很高。但是换成了商品化的ELISA封闭液(明胶)后阳性能到2.2,阴性到0.3,空白对照在0.1以下了。
封闭液是用PBS稀释的,一抗二抗都是使用PBST稀释
另外我检测的是牛的抗体,HRP羊抗牛二抗会不会对脱脂奶粉和BSA这种牛源产生非特异性结合呢,但是用鱼明胶封闭效果也不好,反而用成品化elisa封闭液效果会好很多
请教各位,到底是什么原因造成的呢?
最后编辑于 2023-11-10 · 浏览 772