【经验分享】PC12细胞培养及传代🧫

培养条件: 国际通用1640 +10%FBS+1%P/S配置成的完全培养基，培养基2-3天更换一次

细胞传代:(试剂用量针对T25培养瓶）

1.准备完培 (1640+10%FBS+1%P/S) 、0.25%EDTA、PBS、离心管、1ml枪头、移液枪、培养瓶、封口膜、酒精棉球、镊子

2.倒掉培养瓶中的培养基

3.加入3mIPBS洗涤培养瓶，吸去PBS

4.培养瓶竖立，加入1ml胰酶，转移至显微镜下再铺匀，消化1min左右

5.70%-80%细胞收缩变圆 (形成汪洋大海的感觉! )

6.加入2ml完培终止消化，轻摇混匀 (摇床式前后倾荡

7.移液枪吹打细胞悬液，将培养瓶底面细胞吹下来，避免产生气泡 (将培养瓶竖放底面朝上，轻轻吹)

8.将细胞悬液转移至离心管,250xg离心4min

9.弃上清，加入2ml（可灵活加入，视传代比例调整）完培，充分吹散混匀

10.将细胞1: 2或1: 3传代，每瓶完培总量5ml，摇匀后放培养箱

11.传代次日，观察细胞状态，2-3d换液

12.细胞生长至80%汇合，进行传代或冻存