求助/有跑出过P-eNOS的同学吗
一个140kD的蛋白,我跑了快十回了。条带都是黑的,有时隐隐约约有。不知道是根本没刺激出来,还是WB实验的问题。我的条件:6%-8%的分离胶都试过。上样20ug,电泳70V 40min+100V 55min, 电转100V 100min 或者 250mA 100min。5%BSA封闭(一小时到两小时都试过)。一抗二抗 是santa的,一抗1:200—1:1500都试过,4度过夜。二抗1:5000,摇床一小时。基本都是这个结果,我也加大过给药剂量,但结果好像没有变化。(这个一抗1:1500,比之前全黑要好一点,唉)

最后编辑于 2023-10-23 · 浏览 456