做qPCR的时候遇到不同浓度梯度的标曲CT值相同,求助解决方法

请问大家,自己设计的引物跑qPCR标曲,10^3copies/μl,10^2copies/μl,10^1copies/μl这三个浓度梯度的CT值几乎相同,除了体系被污染,还有其他可能吗?几个月前做的时候,还没出现问题。最近试了几次,引物也换过了,还是会重合(个人觉得不是污染导致的)。可以通过调整qPCR程序来解决这一问题吗?
还有一个问题想请教一下,如果10^8copies/μl的CT值略大,应该怎么调整qPCR的反应程序?

最后编辑于 2023-10-18 · 浏览 1068