microRNA绝对定量做标准曲线
发布于 2023-10-11 · 浏览 561 · IP 湖南湖南
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采用的是加尾法逆转录，PCR孔里终浓度的范围为100pM — 100aM，主要遇到2个问题：
1.100pM(CT:5.353)，10pM(CT:10.472)，1pM(CT:14.869)，100fM(CT:19.241)，10fM(CT:23.046)，这5个点具有良好的线性关系，R2=0.9973，但是斜率k值在-4.5左右，虽然线性很好，但是整体扩增效率不高；
2.后面的1fM和100aM的CT值都和10fM的比较接近，另外100pM的CT值偏大（和其他同学做的其他miRNA进行比较）；
因为做了很久了，也不知道问题到底出在哪里，路过的大神求帮忙解答一下
最后编辑于 2023-10-11 · 浏览 561
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