甘露醇诱导肾小管上皮细胞损伤及其机制

摘要

大剂量使用甘露醇在临床上可导致大范围等距肾近端小管空泡化（isometric renal proximal tubular vacuolization）和急性肾损伤。我们之前已经证实甘露醇诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤。本文旨在进一步研究甘露醇对 HK-2细胞的细胞毒作用及其机制。MTT 法检测细胞活力。观察细胞形态学变化。此外，还测定了丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量。流式细胞仪使用膜联蛋白 V-FITC 和 PI 测定细胞凋亡。另外，用 FITC-Phalloidin 标记细胞的 F- 肌动蛋白，观察细胞骨架的变化。MTT 法显示细胞活力显著降低，且呈剂量和时间依赖性。观察细胞形态学改变，包括细胞膜破裂和细胞脱离。甘露醇处理组 HK-2细胞谷胱甘肽含量显著降低，丙二醛含量显著升高。流式细胞仪检测结果显示250mmol/L 甘露醇处理组 HK-2细胞凋亡率增加。250mmol/L 甘露醇处理48h 后，HK-2细胞的细胞骨架出现解体，甚至出现完全破坏的细胞骨架。因此，大剂量的甘露醇对肾小管上皮细胞有毒性作用，这可能是由于氧化应激破坏细胞骨架及随后的细胞凋亡所致。