求助🆘CCK8实验加药后细胞不死怎么办！

本人用的是6-OHDA处理SH-SY5Y细胞，造帕金森模型。文献大多用的0-100uM的浓度处理细胞，细胞活性呈浓度依耐性下降。IC50大多在，25，50，100uM，其中大部分在50uM。

我按照文献上设置了图一这几个浓度，最开始的第一二次种了15000个细胞，细胞培养三天到百分之70左右，再加药处理一天。50uM差不多在IC50附近，但是空白组OD值不够。后面改种25000~30000个细胞，用图二浓度处理，养两天加药处理一天，发现50uM不减反增了。而低浓度都是增长，我的这个药是有毒性的，文献上也是低浓度就有抑制作用的。

到现在，我种8000个细胞，养一天就到百分之六七十左右，再加药处理一天，75uM的药物浓度细胞才死了三分之一左右，100uM的死了5分之4左右。CCK8数据越来奇怪了。但是我的6孔板中75uM的浓度，细胞死了将近3分之2，100uM的基本上就剩下一点点活细胞了（图三)。我总不能根据CCK8结果在75uM-100uM中间再选一个浓度吧？六孔板细胞这个浓度根本提不出什么蛋白

我用的药是麦克林的，网上大多数造膜用的6-OHDA是sigma的，难道是品牌原因？还是有其他什么原因？有知道的友友吗，麻烦指导一下，拜托了，孩子做CCK8快三个月了，一个能用的结果都没有，帮帮孩子吧