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敲高敲低过表达?一节课专治「转染」疑难杂症

发布于 2023-08-24 · 浏览 1616 · IP 浙江浙江
这个帖子发布于 1 年零 259 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

好的课题,离不开高效准确的基因调控,运用病毒载体和电转等转染工具,可达到快速基因敲低、敲减、过表达的目的,更好协助我们验证基因的功能和表型,但实际操作中仍会遇到很多问题:

质粒载体可以快速表达,但维持时间短,并且对于很多细胞的转染效率较低。 电转是否是转染提效的最优解? 想用病毒工具构建稳定株或是做动物实验,但面对慢病毒(LDV)、腺病毒(ADV)和腺相关病毒(AAV),不知如何选择?

为帮助大家了解常用基因调控工具的优缺点,提升研究效率,2023 年 8 月 29 日丁香园联合镁伽、Lonza,举办「基因调控进阶指南 | 搞定细胞转染与病毒载体」线上直播。本次直播将全面解析 AAV、ADV、LDV 病毒载体的选择和应用,盘点生物、物理、化学转染三类转染方式,结合不同实验场景和需求,教你选择最优解。

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▉▉▉ 通过本次直播你将收获:

01、基础实操:病毒包装完整攻略,从流程到应用教你完成高效递送

各类病毒载体都各具特点,适用于感染不同种类的细胞和动物组织。在这次直播中,讲师将会详细介绍慢病毒(LDV)、腺病毒(ADV)和腺相关病毒(AAV)的优势,并重点探讨AAV的潜力和应用前景

02、提升进阶:掌握「电转」以提高细胞转染效率

转染作为基因调控研究中常用的手段,分为化学转染、物理转染和生物转染等多种方法。在其中,电转染因其高效率和低毒性而备受瞩目。本次直播将从细胞预处理、转染条件优化等多个方面深入探讨如何提升电转染实验的结果,从而获得更高的转染效率和细胞存活率

03、实际应用:病毒载体在 CART 细胞构建中的价值

在本次直播的尾声,中国科学院研究员陈博士,以「病毒载体在 CART 细胞构建中的应用」为案例,从实际操作的角度,向大家演示如何将载体工具应用于具体课题。


▉▉▉ 直播亮点提炼:

如何提升 AAV 感染效率?

虽然 AAV 具有很多优点,如低免疫原性和稳定的长期表达,但操作不当易导致其感染效率相对较低。以下是一些方法,可以帮助提高 AAV 病毒载体的感染效率:

共转染辅助病毒: 使用辅助病毒来增强 AAV 的感染效率是一种常用的策略。辅助病毒通常是腺病毒或其他病毒载体,它们能够帮助 AAV 成功进入目标细胞。

优化转染条件:合理调整 AAV 转染的时间、温度、细胞密度等转染条件,可以进一步提高感染效率。

细胞预处理:通过对细胞进行预处理,如细胞预埋素或特定药物处理,可以改变细胞膜的性质,从而促进 AAV 的吸附和进入。

除了 AAV 感染效率问题外,我们还常遇到 AAV「引起细胞毒性、表达不稳定、长期储存与运输不当」等结果问题。报名本次直播,从工具选择出发,聚焦基因调控,手把手教你巧用 AAV、电转提升感染/转染效率。现场还有一对一答疑、参与互动赢礼品环节,运动手环、充电宝、U 盘等惊喜好礼包邮送,赶快报名吧>>

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最后编辑于 2023-08-24 · 浏览 1616

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