还在为AAV病毒包装忙得团团转吗？

做项目只能从头摸索调研大量文献数据，包出来的病毒滴度很低，稳定性很差，不知道怎么才能提高感染效率，为了诸如此类的问题而日夜发愁。。。

这，是不是屏幕前的你的科研现状？

AAV病毒包装常见问题解答（节选）

Q1 实现AAV在动物体内表达需要注意哪些关键点？

➢ 血清型的选择

AAV的血清型主要由AAV衣壳蛋白的结构所决定，不同的衣壳蛋白结构识别不同的细胞表面受体，因此血清型的选择会影响AAV的感染效率、组织亲和性和开始表达的时间。

➢ 启动子的选择

需要看是选择广谱性启动子还是特异性启动子。相比于血清型的组织特异性，特异性启动子可实现细胞的特异性，因此对特异性要求较高的研究，可以选择某种细胞特异性表达的启动子。

➢ 注射方式

例如，对于可以进行局部注射的组织器官，采用局部多点注射靶器官可取得较好的特异性和表达效果。

➢ 病毒量及滴度

根据不同的靶器官组织和所使用的不同AAV血清型（扩散能力不同），推荐注射的AAV量不同，传递到组织中的病毒颗粒数量对于感染效果影响很大。但AAV使用量并不是越多越好，过多的量可能出现病毒溢出，且根据我们的经验，病毒量太多有时候甚至会导致表达降低的情况。

➢ 检测时间

不同基因的表达高峰时间是不同的，再加上AAV需要从单链DNA变成双链DNA，一般在2周可检测到基因表达，如无抗体产生的影响，基因的表达可持续表达半年以上的时间。

Q2 如何通过AAV实现体内的特异性表达

其实，不止是病毒量及滴度会影响到其在小鼠体内的表达，我们还需要综合考虑多个方面的因素。实现体内特异性调控有以下常见的4种策略：