求教:ATM蛋白WB问题
想检测p-ATM,用的是5%浓缩胶,8%分离胶,转膜湿转150mA 1.5h和300mA 3.5h两个条件都试过。一抗santa,看抗体说明书蛋白印迹基本在225kD以上,看其他大佬的帖子也说了蛋白是350kD。但是我做了两次WB,很稳定地只在120kD的位置有一条带,请问是抗体问题?还是转膜问题?或者其它什么原因呢?
最后编辑于 2023-08-06 · 浏览 533
想检测p-ATM,用的是5%浓缩胶,8%分离胶,转膜湿转150mA 1.5h和300mA 3.5h两个条件都试过。一抗santa,看抗体说明书蛋白印迹基本在225kD以上,看其他大佬的帖子也说了蛋白是350kD。但是我做了两次WB,很稳定地只在120kD的位置有一条带,请问是抗体问题?还是转膜问题?或者其它什么原因呢?
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