QPCR无平台期,且荧光强度低

不同的引物,其它全部相同,同样的荧光sybr 试剂,师姐Qpcr结果的荧光值有2000多,结果好,而我的结果:荧光值只有500左右,没有平台期,融解峰有两个峰,可能有引物二聚体的结构。做了好多次实验,改过RNA逆转录的量,增加和减少CDNA的模板量,结果都差不多。现在猜测是否为自身引物设计的问题,有引物二聚体的结构导致自身扩增效率低。SYBR荧光染料是新买的,不清楚有没有问题。
最后编辑于 2023-07-16 · 浏览 1644
不同的引物,其它全部相同,同样的荧光sybr 试剂,师姐Qpcr结果的荧光值有2000多,结果好,而我的结果:荧光值只有500左右,没有平台期,融解峰有两个峰,可能有引物二聚体的结构。做了好多次实验,改过RNA逆转录的量,增加和减少CDNA的模板量,结果都差不多。现在猜测是否为自身引物设计的问题,有引物二聚体的结构导致自身扩增效率低。SYBR荧光染料是新买的,不清楚有没有问题。
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