双酶切构建PRI101载体失败，出现菌P出现双条带

我用KpnI和EcoR I两个酶切位点想要将我的目的基因（长度约800bp）连接到PRI101载体上（载体上这两个酶切位点相邻）。

双酶切后跑电泳条带如下，第一泳道是原始质粒，2、3泳道是酶切后质粒，酶切后的目的基因没有跑电泳，默认载体切开目的基因就切开了。

然后用T4连接酶过夜连接（体系：buffer：1μl；T4连接酶：0.7μl；质粒100ng,3μl；目的基因100ng,3μl；DD水补足到10μl）

热激涂板后挑单克隆点用M13正负为引物进行菌P的结果

看条带没有连接成功，上面的条带约1300bp应该是空载上的片段，下面的条带约800bp却不知道是什么？

请问大家碰到过这样的情况吗，下面的条带是什么，和我连接失败有关联吗？有没有什么方法可以优化实验提高连接成功的概率呢？

因为楼主是刚接触分子生物实验的学生所以可能理解和阐述的不太到位，请各位大佬不吝赐教，非常感谢🙏