讲清活细胞成像：从实验操作、常见问题到应用案例
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活细胞成像「深似海」，想要获得完美的高清图像绝非易事。其中最大的「槽点」莫过于——细胞状态不佳，也是活细胞成像的难点之一。
好在办法总比困难多！做到 3 点就能解决上述困扰：首先要保证细胞始终处于生理状态，包括选择合适的培养皿、利用二氧化碳缓冲体系或 HEPES缓冲液等，维持细胞合适的 PH 环境； 其实是防止污染，培养体系中一定加入抗生素，同时注意保持操作器械的洁净； 最后是有效避免光毒性，尽可能降低光强和激发时间，降低帧速率。
但细胞成像中的「绊脚石」仍层出不穷：
- 细胞运动导致焦点模糊
- 观察过程中细胞偏出视野
- 荧光探针与组织样本不兼容……
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- 活细胞成像如何进行有效的荧光标记（探针的选择组合和优化）
- 为避免光毒性，如何进行明场下活细胞成像
- 大数据下，高通量成像的应用
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