请教用加尾法进行microrna的反转录和qpcr
这个帖子发布于 1 年零 341 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
U6内参的扩增曲线和熔解曲线都很好，但一测miR就是都不行，扩增曲线出现平台期下降，熔解曲线单峰的情况很少，几乎都是双峰或宽峰，即使少数较尖锐的单峰熔解温度也很低，75-76度左右。
有必要做NRC吗？之前做了几组NTC发现存在引物二聚体的情况，但miR的上游引物基本就是全序列了，cDNA已经稀释到100倍了，引物10μM从0.6μL降到0.4μL了，提高退火温度基本没有改善，不知道还能怎么优化了，请教一下大家
最后编辑于 2023-07-02 · 浏览 834
1 收藏点赞
