新人求助｜表达载体的无缝克隆
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花匠是自己 推荐最近在做重组质粒构建，老师给的原方案是“双酶切得目的片段—双酶切载体，得黏性末端缺口—T4连接酶连接”，但是载体双酶切后只小了20bp，不好切，也没法验证切没切下来，只能直接盲连，然后转化筛选测序，感觉效率很低下。
所以看了一些综述了解到无缝克隆，感觉可行；看诺唯赞说明书写的是可适用于任何载体，但老师说我的载体不能用无缝克隆？因为是表达载体就不能用无缝克隆？我没太理解，因为根据诺唯赞的添加同源臂的方法，我感觉只要载体线性化的位点选在多克隆位点里就不会影响表达吧，，？
本科生懂得不多，全靠胡乱摸索，恳请各位大佬赐教
最后编辑于 2023-07-02 · 浏览 689
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