WB配胶转膜问题

有几个问题想请教一下

1.请问配的胶有时候会有气泡是什么原因？对后续结果是否会有影响？已经保证了玻璃板和下面的垫是完全干燥的，配胶的时候在管子里混匀吹打了几十次且没有气泡，加的时候贴着一侧加的，之后用无水乙醇压胶。加完之后看不出气泡，凝了之后就很明显了。如图。

2.关于转膜的问题，湿转100v恒压，我看小黄老师的帖子里说初始电流在220左右是正常的，但是我用新配的转膜液经常是180，反而第2，3次用的时候会到220左右，这个有影响吗？有时候同时转两块三明治，第一个到时间取出来再继续转第二个的时候电流会明显上升，会从170，180到220，230，请问这个会影响后面的转膜吗？

3.有几个具体的条带麻烦帮忙分析一下。

3.1

最下面是我的目的蛋白，110kd左右，我发现我跑100kd以上的膜经常会特别脏，有时候还有重影，请问这是转膜的问题（100v 120min）？还是后续封闭（牛奶2-3h）？或是洗膜的问题？

3.2

这是跑的不好的内参，有的时候能跑的比较齐，形状也很均匀，有时候就会有这种比较奇怪的形状，或者中间发虚像缺了一点一样，这种可能是什么原因？是配的胶有问题吗？或是转膜的时候有气泡？

求大佬们指导一下 @Wb还不错的小黄