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qPCR溶解曲线异常

发布于 2023-06-21 · 浏览 669 · IP 宁夏宁夏
这个帖子发布于 1 年零 349 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
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是这样的,我的一个目的miRNA在经药物作用后溶解曲线一直不合适,具体如下:

img

目的基因溶解曲线如上图

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内参溶解曲线如上如上

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目的基因扩增曲线如上

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目的基因内参扩增曲线如上。

我的操作是模版稀释了5倍做,引物加入了0.6μL,是20μL的反应体系,退火温度是60度(课题组用59度就做出来了),用了三步法。用琼脂糖凝胶电泳做了后发现目的基因的结果是这样:

img

内参的胶图是这样:

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救救小白吧,现在是完全没有办法搞定这个qcr了,也不知道问题出在哪里,谢谢大神的不吝赐教。

最后编辑于 2023-06-21 · 浏览 669

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