小鼠脊髓纵切-冰冻切片

各位老师好！本人目前实验要进行的是：小鼠脊髓冰冻切片，沿矢状面纵切片，观察再生情况。

前期切片厚度16-18um，但染荧光 看再生断断续续，打算切厚一些进行Z轴投影，不知道多厚合适？担心太厚了1抗二抗孵育不全。