怎么检测细胞内粘度？
Q：请问各位大神怎么养可以检测细胞内粘度或者粘性呢？之前查的都是一些新发明的专利或者论文进行荧光探针，但要是想自己做的话有没有一个通用或者现在行业内普遍用的检测方法呢？或者国内有没有公司可以进行这个实验的检测呢？
A1：检测细胞内粘度或粘性的方法有很多种，以下是其中几种常用的方法：
1. 球形落体法（Ball-drop method）
该方法是通过让小球自由落体并记录下来下落时间和距离等参数来计算出粘度。这种方法需要使用特定的装置和设备，因此需要进行一定的准备和实验操作。
2. 微流控技术（Microfluidic technology）
微流控技术可以通过在通道中注入不同浓度的聚合物或纳米颗粒，根据其在通道中的运动速度计算细胞内粘度。该方法需要特定的微流控装置和设备，并需要进行精细的实验操作。
3. 荧光蛋白探针法（Fluorescent protein probes）
通过标记特定的蛋白质，在细胞内形成荧光探针，根据其荧光强度来计算细胞内粘度。这种方法需要进行基因工程和荧光探针合成等操作，操作复杂。
目前市场上也有一些公司提供细胞粘度检测服务，也可以找公司来做等。
Q：DPBF探针用于捕捉单线态氧，用水当对照，在36W的白光下照，在水中吸光度值自动下降，这该怎么解决
A1：可能由于溶液试样反应太快，生成产物容易降解所造成。
A2：可能有几个原因导致这种情况：
1. 光降解：某些化合物在强光下可能会发生光降解，导致吸光度值下降。确保您的实验条件中没有存在可能导致光降解的物质。
2. 反应饱和：DPBF与单线态氧的反应是一个消耗性反应，当单线态氧的生成速率超过DPBF的消耗速率时，吸光度值会下降。这可能是由于高光强下单线态氧生成速率过快，使DPBF无法及时捕捉所有单线态氧。
A3：用蒸馏水当对照吧，水中的杂质会影响吸光度测量的准确度
Q：一般细胞冻存冻存液只用胎牛血清可以么
A1：传统细胞冻存液是向培养基中加入保护剂，一般是10%二甲基亚砜（DMSO）和10%-90%的牛血清。
A2：冻存细胞一般常用胎牛血清（FBS)和二甲基亚砜（DMSO）。血清是维持细胞生存环境；DMSO是冷冻保护剂，使细胞免受低温冰晶形成、及渗透压改变而导致的物理损伤；
A3：需要用10%的DMSO，它的作用是将细胞的水分子置换出来，以免再低温状态下水分子形成冰晶损伤细胞。
Q：怎样在显微镜下判断贴壁细胞生长状态的好坏
A1：把培养瓶放入显微镜下观察,培养液中无杂质（可能是细胞死亡破裂）、细胞无悬浮或微量悬浮、细胞饱满透明.视野中贴壁细胞贴壁均匀.观察到这些就说明细胞生长很好了
A2：体外贴壁生长的细胞可以通过观察细胞的折光率,状态好的细胞透光性好,就是看起来细胞发亮,另外就是细胞胞浆内颗粒状物质较少,细胞胞浆体积较小,整个细胞的外形比较紧凑,没有肥大.还有就是细胞生长均匀,如果某一小片细胞过多或者过少,细胞状态必然不好
A3：细胞的形态大小正常，细胞质中没有很多的黑点或者空泡
Q：请问一下，使用DMSO溶解的药物，在对培养的细胞进行处理时，选择怎样的阴性对照？如果有药物、LPS刺激细胞，这两种物质的话，应该追加一组阴性对照还是两组？是追加在只有细胞的这组➕DMSO ，还是追加在药物➕LPS➕DMSO这组？
A1：追加两组阴性对照，细胞的这组+DMSO，还有细胞组什么也不加。
A2：追加药物➕dmso作为阴性对照就足够了
A3：一般是只用细胞加DMSO做对照就可以的
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最后编辑于 2023-06-05 · 浏览 695
