基因预测是不是转录因子?
Q：真菌中有一个基因定位在细胞核，但是不知道是不是转录因子，想要预测一下，网上参考了几个网站，JASPAR等，但是具体不知道该怎么预测，请问有大神预测过转录因子么？
A1：常用的就是JASPAR，打开JASPAR，把你需要预测基因直接输进去，出现Motif的就是转录因子，啥都没有的就不是。不过JASPAR中的转录因子并不全。还可以去NCBI-gene 输入你的基因，会有对这个基因的描述
A2：转录因子结合位点序列具有保守性，通常为一段6~12bp的DNA序列，最多不超过20bp。可以通过验证这段特异性序列来预测转录因子，或者上jaspar网站上预测一下保守序列
Q：牛奶中的8个蛋白，异源表达出来如果纯化出来怎么测活性啊，而且有些蛋白能还有一些保健特性，如果要做成产品的话该怎么做(有没有食品的同仁解答)
A1：有些蛋白会有专门的活性检测试剂盒。
Q：灭活血清的时候有其他事情忘掉血清还在灭活了，现在灭活了十个小时，还能用吗？
A1：灭活时间过长，会造成血清品质下降，影响实验结果
A2：不建议用了，灭活10小时活性肯定衰减了
Q：之前测的elisa，我用LPS和干扰素伽马诱导巨噬细胞3小时，然后换液培养48小时，还有给药组，结果elisa测出来LPS组的白介素10水平最高，不知道什么原因，求大神指点
A1：考虑是干扰素伽马的浓度不够，所以elisa测得白介素组是lps的高，建议提高干扰素诱导浓度后再做elisa
Q：养了一批大肠杆菌，想要获得外膜蛋白。不走基因合成路线，有什么好方法吗各位？
A1：分离细菌外膜蛋白的方法：
① 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌，37℃，200rpm。
② 10000g、20min、4℃离心，去上清。
③ 20ml预冷的Tris-Mg缓冲液重悬，同样条件离心，再重悬于预冷的Tris-Mg缓冲液。
④ 超声波破碎细菌。
⑤ 3000g，10min、室温下离心去除未破碎细菌。小心吸取上清（含有胞质成分和细菌外被成分）。
⑥ 超速离心I：100,000g，60min，4℃，去除上清（胞质成分），收集细菌外被成分。
⑦ 用10ml含2％的SLS的Tris-Mg 缓冲液重悬沉淀物，室温温育20-30min。
⑧ 超速离心II：70,000g，60min，室温沉淀收集外膜蛋白，去除上清（含细胞质膜）。重复⑦、⑧两步。
⑨ 充分吸除上清，并根据沉淀体积大小用0.1-0.2 ml的ddH2O重悬沉淀物。根据公式：蛋白浓度(mg/ml)=1.450 D280-0.740 D260测定外膜蛋白浓度，调节蛋白浓度至40ug/ul，该蛋白质样品-70℃贮存。
A2：可以通过重组表达的方式获得大肠杆菌外膜蛋白 OmpC和OmpF
Q：如何筛出高产蛋白酶的乳酸菌
A1：利用透明圈法筛选出高产蛋白酶的乳酸菌。
A2：使用添加碳酸钙的改良乳酸菌的固体培养基通过单因变量的改变，可以筛选分离得到高蛋白酶活性的乳酸菌种。
丁香实验×安捷伦——细胞实验专场提问活动开始啦！
活动期间，在丁香实验小程序上抛出你的细胞实验问题，就能得到竹节杯、定制雨伞、U 盘等实物奖励，还可获得丁当虚拟奖励，可在丁香商城兑换心仪的礼品哦～
科研提问活动 · 细胞实验专场
活动时间：4 月 18 日～6 月 13 日
主题：细胞实验
（请先发布提问，再填写收货信息）
怎么才能获得这些奖励呢？轻松 2 步就能拿奖品
Step 1：
👉 方式一：直接进入丁香实验小程序，点击底部【我要提问】，提出你的细胞问题，关联细胞提问活动，即可。
👉 方式二：戳下方链接进入丁香实验问答广场，点击底部的蓝色按钮【我要提问】输入问题，选择关联「细胞领域」的实验，点击提交。
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Step 2：
等待自己的提问发布后，戳下方链接填写地址👇，坐等奖品到家，就这么简单！
【细胞实验提问活动规则】
①提交真实的细胞实验问题，并且通过审核，在前台发布，视为成功参与
②按照提问通过审核的个数，发放对应奖励。
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-前 10 位提交满 3 个问题：可获得U盘 1 个 ，先到先得，不可与定制雨伞兼得
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③通过审核，符合奖励发放要求的，填写地址后 21 个工作日内统一邮寄
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1、活动最终解释权，归丁香实验所有
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最后编辑于 2023-06-01 · 浏览 818
