为什么我的LLC细胞总养不活？无法传代
Q：为什么我的LLC细胞总养不活？无法传代
A1：推荐使用DMEM培养基，培养基容易变黄，密度过高细胞易死亡。
A2：LLC细胞推荐使用DMEM培养基，含10%胎牛血清，在37度、5% CO2培养箱中培养。LLC细胞营养消耗快，培养基容易变黄，密度过高时细胞易死亡。
建议每周3-4次更换新鲜培养基，按1:3至1:4进行传代，传代周期2－3天，室温胰酶消化1-2分钟。
A3：LLC细胞密度过高，营养不足容易造成细胞死亡，建议及时传代处理，使用高品质的胎牛血清更有利于细胞生长。
Q：DPBF探针用于捕捉单线态氧，用水当对照，在36W的白光下照，在水中吸光度值自动下降，这该怎么解决
A1：可能由于溶液试样反应太快，生成产物容易降解所造成。
A2：可能有几个原因导致这种情况：
1. 光降解：某些化合物在强光下可能会发生光降解，导致吸光度值下降。确保您的实验条件中没有存在可能导致光降解的物质。
2. 反应饱和：DPBF与单线态氧的反应是一个消耗性反应，当单线态氧的生成速率超过DPBF的消耗速率时，吸光度值会下降。这可能是由于高光强下单线态氧生成速率过快，使DPBF无法及时捕捉所有单线态氧。
A3：用蒸馏水当对照吧，水中的杂质会影响吸光度测量的准确度、
Q：买了碧云天S0023试剂盒测NO含量，做出了标准曲线 测了样品A540的吸光值，还算了蛋白的浓度 请问后面数据要怎么分析啊
A1：用测出的样品吸光度值带入到NO标准曲线中，就可以得到样品的NO浓度，然后可以分析变化趋势
A2：对于测定NO含量的实验数据分析，以下是一般的步骤和考虑事项：
1. 标准曲线斜率和截距：根据标准曲线，计算出斜率和截距。这些参数将用于将样品的吸光值转换为NO含量。
2. 样品吸光值转换：使用标准曲线的斜率和截距，将样品的吸光值转换为对应的NO含量。根据你提到的测定方法，可能需要参考已知NO含量和吸光值的对应关系进行转换。
3. 蛋白浓度的校正：如果你已经测定了样品的蛋白浓度，你可能需要将NO含量校正为每毫克蛋白的含量。这样可以更准确地比较不同样品之间的NO含量。
4. 统计分析：根据你的实验设计和研究目的，可以考虑进行统计分析来评估结果的显著性和可靠性。常见的统计分析方法包括 t 检验、方差分析（ANOVA）等。确保使用适当的统计方法，并在报告结果时提供适当的统计指标，如均值、标准差、置信区间等。
5. 结果解释：根据实验目的，解释和讨论你的测定结果。将结果与先前的研究或文献中的相似研究结果进行比较，并提供可能的解释或结论。
请注意，具体的数据分析方法和步骤可能因使用的试剂盒和测定方法而有所不同。建议参考你所使用的碧云天S0023试剂盒的说明书。
Q：挥发酸产生更多，为什么不能缓冲挥发酸的碳酸盐缓冲系反而是更重要
A1：挥发酸是指能够在溶液中释放出挥发性气体（通常是二氧化碳）的酸。当挥发酸产生更多时，碳酸盐缓冲系统的作用变得更为重要，而不是能够缓冲挥发酸。
碳酸盐缓冲系统是一种重要的酸碱缓冲系统，由碳酸盐（通常是碳酸氢盐和碳酸盐）和其对应的酸碱共存形成。当挥发酸增加时，它会与碳酸盐反应生成二氧化碳和水，从而降低溶液的pH值。然而，由于碳酸盐缓冲系统的存在，它能够接受或释放氢离子以抵消酸性或碱性的变化，从而维持溶液的稳定pH值。
因此，虽然挥发酸产生更多可能导致溶液的酸性增加，但碳酸盐缓冲系统的存在可以帮助维持溶液的pH值稳定。这是因为碳酸盐缓冲系统能够通过调节二氧化碳和水的平衡来抵消挥发酸产生的酸性变化，确保溶液保持在所需的酸碱范围内。
需要注意的是，缓冲能力也有一定的限度，当挥发酸过多时，可能超过碳酸盐缓冲系统的能力，导致溶液pH值的变化。在这种情况下，可能需要其他缓冲系统或调整条件以控制酸碱平衡。
A2：因为当挥发酸产生过多的时候，挥发系统的缓冲能力已经被透支，所以主要靠碳酸盐缓冲
Q：求问培养神经元细胞系的培养基只能用Neurobasal嘛，可以用DMEM/F12吗？
A1：神经元细胞不太好养，用T25瓶吧，六孔板容易污染
A2：neurobasal(neurbasal-A)被认为是最标准，最好的培养基。需要的添加剂为 B27和谷氨酰胺。
A3：培养神经元细胞时，选择适合的培养基是非常重要的。Neurobasal培养基是一种经常用于神经元培养的基础培养基，它经过优化，包含了神经元生长所需的关键组分。使用Neurobasal培养基通常可以提供较好的神经元细胞生长和功能表现。
DMEM/F12培养基也常用于神经细胞培养，但相比于Neurobasal，它通常需要额外添加一些特定的成分（如神经营养因子、维生素、抗生素等）来支持神经元的生长和功能。
在选择培养基时，建议首先考虑已有的文献或该细胞系的原始培养条件。如果该细胞系已经在Neurobasal培养基中获得了良好的生长和细胞状态，那么最好继续使用Neurobasal培养基。如果你打算尝试使用DMEM/F12培养基，建议在开始之前进行文献研究，并查阅相关的细胞培养条件和优化方案。
关于培养器皿的选择，T25细胞培养瓶和G孔板都可以用于神经元细胞的培养。选择合适的培养器皿应该考虑到细胞数量、实验需求和所需细胞密度的合适范围。如果你需要扩展细胞数量，T25细胞培养瓶可能更适合；而如果你需要进行高通量筛选或细胞分析，G孔板可能更方便。
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最后编辑于 2023-05-26 · 浏览 1292
