视网膜免疫荧光咨询

想请教一下大家关于免疫荧光的相关问题，对大鼠的眼睛进行蜡块切片，用了IBA-1（标记小胶质细胞的）另一个是CD4+，标记的结果如下图所示。视网膜属于中枢系统，正常情况下是不会含有CD4细胞的，在病理的情况下才可能出现外周的T细胞向中枢的浸润。现对大鼠的视网膜蜡块进行了标记，发现视网膜上IBA-1和CD4+标记的区域重合，重做了两次，结果一样，是什么原因呢？请教了一下别人，说可能是CD4表达太少，扫描的时候亮度拉的原因？不是很董，如果CD4+表达太少，应该就标记不上呀，为什么回和IBA-1标记的区域重合呢？