蛋白dot blot问题求助
发布于 2023-04-19 · 浏览 1291 · IP 湖北湖北
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花匠是自己 推荐
花匠是自己 +5丁当- 本人蛋白dot blot步骤：PVDF膜用甲醇浸泡几秒，自然晾干，将制好的蛋白样（与WB制样方式一致）点在膜上（2微升），自然晾干（晾干后能看出点样的位置变得半透明），5% BSA 室温 封闭1小时（因为蛋白样里有蓝色上样缓冲液，一放在封闭液中蓝色就弥散到液体里了），室温下用 BSA/TBS-T 孵育 一抗30 分钟，用 TBS-T 洗涤 3 次（3 x 5 分钟），室温下用二抗孵育 30 分钟，用 TBS-T 洗涤 3 次（3 x 5 分钟），显影。
- 问题：请问步骤有什么问题？点样的位置为什么会变得半透明？显影之后也是半透明，与文献中结果不一样
最后编辑于 2023-04-19 · 浏览 1291
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