southern blot化学发光检测,背景太强,但斑点无信号
实验目的:探索确定生工合成的地高辛探针的最佳使用浓度;
实验操作:将探针稀释不同浓度点在尼龙膜上,80℃固定2小时,然后进行抗DIG-AP抗体抗体(用dd H2O做抗体稀释)孵育(这里省略了洗涤和封闭环节,因为没有做杂交和没有非特异性位点),然后在AP缓冲液(Tris-HCL、Nacl)中平衡2min,加CDP-Star发光底物;
实验结果:用化学发光成像仪成像只有背景,无斑点信号
问题:1.请问我这种探针浓度的测试方法是否正确?
2.背景强而无斑点信号的主要原因是什么?

最后编辑于 2023-04-13 · 浏览 455