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southern blot化学发光检测,背景太强,但斑点无信号

发布于 2023-04-13 · 浏览 455 · IP 北京北京
这个帖子发布于 2 年零 27 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

实验目的:探索确定生工合成的地高辛探针的最佳使用浓度;

实验操作:将探针稀释不同浓度点在尼龙膜上,80℃固定2小时,然后进行抗DIG-AP抗体抗体(用dd H2O做抗体稀释)孵育(这里省略了洗涤和封闭环节,因为没有做杂交和没有非特异性位点),然后在AP缓冲液(Tris-HCL、Nacl)中平衡2min,加CDP-Star发光底物;

实验结果:用化学发光成像仪成像只有背景,无斑点信号

问题:1.请问我这种探针浓度的测试方法是否正确?

2.背景强而无斑点信号的主要原因是什么?

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最后编辑于 2023-04-13 · 浏览 455

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