(WB条带分析)如何调整实验条件？
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目的蛋白分子量90kDa
电泳：80V浓缩胶，120V分离胶
封闭：脱脂奶粉1h或者快速封闭液10min
转膜：恒流200mA，2h
一抗4°孵育过夜，二抗（1：5000）室温下1h.
问题1：背景很深，杂带也很多，很多时候爆不出目的蛋白；
问题2：每次显色，位于70位置的marker颜色非常深，第二张图marker发白。
大神们，我该怎么改进。
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