大鼠原代心肌细胞提取
酶:0.075%胰蛋白酶(EDTA),1%胶原酶 2 型;
时间:先胰酶4°过夜(10h 左右),后胰酶+胶原酶(1:1)混合消化 8min,37°;
消化次数:37°水浴锅混合酶手动摇晃消化 4 次,70 目细胞筛;
乳鼠:15 只,出生 24h 以内
差速贴壁:70min,两次;
心肌细胞贴壁:至少 72h,形状如图所示
培养基:DMEM-F12, 15% FBS,双抗 (50mL+167.5uL Brdu(10mg/ml 原液))
铺板:6 孔板每孔最少 50 万原始细胞,一周左右可得到非常纯净的,跳动的,密度合适的心肌细胞(会有少量增值,约 60-70%密度)。



最后编辑于 2023-04-05 · 浏览 1433